PichiaPink Strain4是畢赤酵母Pink菌株，屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母 培養(yǎng)菌株污染，往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來抑制細菌菌的污染和生長。

PichiaPink Strain4酵母適宜的生長溫度是24-30度，溫度超過32度對于細胞內的蛋白表達是毀滅性災難，可能導致細胞的死亡。

ADE2基因編碼磷酸核糖甲酰胺咪唑羧化酶基因，該基因能夠催化嘌呤核苷酸合成的第六步反應。在釀酒酵母，畢赤酵母，或者其他酵母中，這個基因的突變或缺失能夠導致嘌呤前體在酵母細胞內液泡內的積累，使得細胞呈現(xiàn)粉紅色。

Pink4酵母菌株是ade2營養(yǎng)缺陷型，細胞內的ade2基因被缺失，部分ade2啟動子也被缺失，所以菌株在缺乏腺嘌呤（adenine）的培養(yǎng)基中 無法生長，而且在富培養(yǎng)基中生長緩慢。將含有ade2基因的表達質粒轉化進入該菌株中后，能夠使得菌株獲得在腺嘌呤缺乏的培養(yǎng)基中生長，而且菌株顏色由 ade2基因缺失時的粉紅色恢復為白色。從而間接的指明那些克隆菌株轉化質粒成功。

配套載體是pPinkα-HC, pPink-HC 或者pPink-LC。

PichiaPink Strain4是pep4基因敲除酵母菌株。pep4基因編碼蛋白水解酶A，是細胞液泡內的天冬氨酸蛋白酶，能夠自激活。由于蛋白水解酶A對于細胞內液泡 的其他蛋白水解酶類也起到很重要的作用，所以pep4基因敲除的菌株，其蛋白水解酶B活力也下降了，而且細胞內的羧肽酶Gama活性也喪失，這樣可以保護 表達產物免受降解，促進表達量的提高。

PichiaPink Strain4是prb1基因敲除酵母菌株。prb1基因編碼蛋白水解酶B，是細胞液泡內的絲氨酸蛋白酶，屬于枯草桿菌蛋白酶家族。細胞內蛋白水解酶B的缺失可以保護 表達產物免受降解，促進表達量的提高。

PichiaPink Strain4的蛋白水解酶A和B都被基因敲除了，因此是Pink系列菌株中蛋白酶活性最低的一個宿主菌，能夠有效抑制和避免蛋白質的降解！

菌株類型：

畢赤酵母，彩虹酵母

培養(yǎng)基:

YPD培養(yǎng)基

生長條件:

24-30 ℃,  有氧

基因型:

ade2, pep4, prb1

表型:

Ade2- pep4- prb1-

抗性:

氨芐和卡那

質粒轉化條件:

電轉

應用:

酵母蛋白表達，真核細胞蛋白表達